Odborné textyRepetitorium - klinická genetikaRepetitorium - aplikace procedur

Imunochemické metody v analýze proteinů

AJDOL

Imunochemické metody se používají pro specifická kvantitativní stanovení jednotlivých proteinů s použitím specifických antisér.

 

a)       ekvilibrační metody  (hodnotí množství vzniklého komplexu Ag - Ab )

b)       kinetické měření vzniku komplexu (rychlé, přesné)

·              někdy jsou tyto postupy méně citlivé - při nízké afinitě nemá protilátka dostatek času k reakci

 

Imunochemické metody využívají postupy:

·              turbidimetrické

·              RID

·              nefelometrické

·              elektro-imunochemické

·              RIA

·              EIA

 

Obecná charakteristika imunochemických metod stanovení proteinů
                                                                      

Detekční limit

citlivé pro koncentraci

nefelometrické metody

nad 10 mg/l

turbidimetrické

20 - 30 mg/l

RID - závisí na kvalitě separačního prostředí

10 - 20 mg/l 

RIA metody

velmi citlivé (ug/l), např. IgE v séru

 

Přesnost v sérii

kinetické metody

nefelometrické

CV% do 5%

turbidimetrické

ekvilibrační metody (je používána vlastní slepá)

RIA

CV 5-10 %

RID a EIA

CV 5-15 %

 

Čas odezvy (TAT)

 

minuty

nefelometrická a kinetická turbidimetrická měření

hodiny

ekvilibrační (inkubační) metody

dny

RID 24-48 hod.- inkubace, nevhodné pro statimy

RIA obvykle hodiny nebo dny požadavek měření větších sérií

 

 

 

 

Jaroslava Vávrová

 

.