1. Výklad pojmů
Verifikace je poskytnutí objektivních průkazů o splnění specifikovaných požadavků. Jako příklad lze uvést verifikaci homogenity referenčního materiálu nebo verifikaci výkonnostních parametrů měřícího systému.
Validace je druh verifikace, kterým se získávají
objektivní průkazy o tom, že specifikované požadavky jsou vhodné pro zamýšlený
účel
Všechny měřicí postupy, používané odborně způsobilou laboratoří musí, být bezpodmínečně validované, tedy jejich soulad se zamýšleným použitím musí být objektivně prokázán.
Objektivní průkazy validace mohou být získány jak experimentálně, tak i z dokumentace (studií dat výrobců, certifikátů).
Směrnice 98/79 ES, podle které je regulován trh s diagnostickými reagenciemi IVD, deklaruje jako jednu ze základních podmínek notifikace IVD výrobku to, že je na trh uveden již validovaný.
2. Validační plán měřícího postupu
Stanovuje postupy, kterými se získávají výkonnostní znaky (znaky analytické metody). Náplň validačního plánu by měla být kombinací doporučení expertů (odborná společnost), norem, směrnic a uživatelů. Experti obvykle formulují návrhy na postup a náplň validace, normy mohou formulovat buď požadavky na dokumentaci validačních protokolů (ISO 17025, ISO 15189), nebo definovat rozsah poskytovaných validačních dat (Směrnice IVD 98/79 ES).
3. Rozsah validace
Volí se pro měřicí postupy zvlášť podle jejich zamýšleného použití. Neměl by být přehnaně velký, ale musí být postačující. Odpovědnost za úplnost validace konkrétního měřicího postupu je v konečné fázi věcí laboratoře.
Precisnost, vychýlení, měřicí rozsah (linearita) a specifičnost musí být součástí validace prakticky v každém případě.
Výsledky validace a závěry z nich učiněné dokumentuje validační protokol. Musí být dostupný pro všechny druhy prověřování-auditu.
4. Mezi výkonnostní parametry měřicího postupu (znaky analytické metody) patří:
· precisnost (opakovatelnost, mezilehlá precisnost)
· vychýlení, výtěžnost
· specifičnost a interference
· meze detekce/stanovitelnosti
· linearita, citlivost
· měřicí rozsah
· robustnost
Stanovené výkonnostní parametry měřicího postupu musí být v souladu s předem formulovanými požadavky a ty jsou dány zamýšleným účelem. Nelze například používat postup měření, který nevykazuje dostatečnou přesnost, požadovaný měřicí rozsah, mez stanovitelnosti. Ale naopak enormní snaha o zlepšování výkonnostních charakteristik v případě, že již mají dostatečnou úroveň, je neefektivní a ekonomicky náročná.
Výkonnostní charakteristiky měřicího postupu poskytují data pro vyhodnocení nejistoty měření.
5. Pojetí verifikace a validace měřících postupů v klinické laboratoři
Validace je průkaz, že požadavky na měřicí postup jsou pro zamýšlený účel jeho použití splněny. Data validace poskytují v mnoha případech výrobci in vitro diagnostik (IVD). Lze je také převzít z publikací uznávaných autorů obecně Verifikace je průkaz, že laboratoř je schopna provádět validovaný měřicí postup spolehlivě (správně a přesně) na potřebné úrovni.
Není možné, aby laboratoř převzala i nejpodrobněji validovaný postup od jiné laboratoře, od výrobce, z normy, aniž by verifikovala určité výkonnostní znaky a prokázala tak, že je schopná postup realizovat. Velmi účinnými nástroji verifikace jsou zejména:
· vnitřní řízení kvality - IQC
· externí hodnocení kvality - EQA
· měření referenčních materiálů za účelem stanovení hodnoty vychýlení
6. Výkonnostní charakteristiky měřicích postupů, které má poskytnout výrobce IVD se značením shody „CE“
· mezilehlá precisnost (intermediate precision)
· opakovatelnost
· reprodukovatelnost
· specifičnost/interference
· vychýlení (bias), výtěžnost
· měřicí rozsah (platnost kalibračního vztahu)
7. Jak zacházet s výkonnostními charakteristikami získanými experimenty nebo z dat?
· porovnat s hodnotami, doporučenými experty a/nebo požadovanými mezinárodními doporučeními
· porovnat s tabelovanými hodnotami biologických variabilit například uvedenými na webové stránce http://www.westgard.com
· porovnat s daty, uvedenými výrobci v jejich pracovní dokumentaci
· verifikovat opakovatelnost, mezilehlou přesnost a vychýlení (výtěžnost) k odhadu nejistoty měření
· verifikovat ve vhodných časových periodách, jejichž velikost je dána mírou problematičnosti měření a doporučeními expertů
· jednou ročně verifikovat metodu v každém případě
8. Doporučená struktura validačního protokolu metody typu „in-house“
· plán validace
· výsledky validačních experimentů
· data, získaná z dokumentace a certifikátů
· požadavky na vhodnost pro zamýšlený účel
· experimentálně stanovené výkonnostní charakteristiky
· závěry z porovnání stanovených a požadovaných hodnot výkonnostních parametrů
· popis zodpovědnosti pracovníků
· plán verifikací
· vytvoření řízeného dokumentu
9. Doporučená struktura verifikačního protokolu měřicího postupu IVD
· plán verifikací
· výsledky verifikačních experimentů
· data výkonnostních charakteristik poskytnutých výrobcem
· porovnání výsledků verifikace s požadavky na vhodnost pro zamýšlený účel
· porovnání výsledků verifikace s validačními daty výrobce
· popis zodpovědnosti pracovníků
· vytvoření řízeného dokumentu
Další informace
Bedřich Friedecký, Josef Kratochvíla, Zdeněk Kubíček
recenze Zbyněk Plzák