Kazuistiky a příklady›Příklad

Příklad 039: Hodnoty vychýlení pracovních kalibrátorů

BFAHX

Hodnoty vychýlení pracovních kalibrátorů

 

5.1. Příklady stanovení analytů

Stanovení provedeno analýzou dvou kontrolních materiálů typu CRM

·         hluboce zmrazené směsi nativních lidských sér

·         lyofilizovaného CRM, certifikovaného RIfB DGKL Bonn, Německo

Certifikace cílových hodnot: Certifikace hodnot se provádí referenčními metodami v referenčních laboratořích (celosvětová dimense v souladu s doporučeními JCTLM [7, 8, 9] a v návaznosti na BIPM/CCQM/IRMM Geel. Studie - Analyty, použité k demonstraci výsledků z experimentu IRMM Geel - IMEP-17 [16]

 

Postup při určování hodnot vychýlení:

 

Mezilaboratorní pokus, 39 laboratoří, každý referenční materiál CRM měřen v jedné sérii n =10, oba CRM pak měřeny paralelně

Místa měření: rutinní laboratoře Dánsko, Norsko, Island

Bias B: B = Xprůměr- Xcert.hodnota [%]

Hodnocení výsledků: centrální

Výrobci: 5 (Abbott, Bayer, Dade-Behring, Ortho, Roche)

Anal. měřicí systémy: 12 ( Aeroset, Architect, Advia 1650, Cobas 400, Cobas 700, Cobas 800, Hitachi 911, Hitachi 912, Hitachi 917, Modular, Vitros, Dimension PxL)

Hodnocené skupiny anal. měřicích systémů:

A) Abbott: Aeroset = 3 , Architect = 4 (celkem 7)

B) Bayer: Advia 1650, (celkem 10)

C) Dimension RxL = 2, Olympus AU 450 = 1, Kone = 1 (celkem 4)

D) Roche Cobas: Integra 400 = 3, Integra 7000 = 5, Integra 8000 = 9, Cobas Mira = 1, (celkem 18)

E) Roche Hitachi: Hitachi 911 = 2, Hitachi 912 = 6, Hitachi 917 = 5, Hitachi Modular = 11 (celkem 24)

F) Ortho: Vitros 250 = 9, Vitros 950 = 9 (celkem 18)

 

Kritérium: TMU = 0,375 . CVb [%] (CVb je celková biologická proměnlivost (variabilita))

Zvolené kriterium je minimální (minimum acceptable performance)

 

 

5.1.1. Stanovení albuminu

Certifikovaná hodnota referenčního materiálu CRM:

  • nativní CRM = 41,5 g.l-1 albuminu
  • lyofilizovaný CRM = 36,2 g.l-1 albuminu

Kritérium vychýlení: 2,1 %

Rozsah vychýlení při zaokrouhlení na celá čísla:

Anal. systém

A

B

C

D

E

F

Rozsah bias

[%]

-2 až +20

+1 až +5

-2 až +2

0 až +10

0 až +10

-5 až +5

Rozsah bias

[%]

IMEP–17 (2002) -10 až +10

Počet měření přesahujících kritérium 2,1 %:

  • nativní CRM: (44/65) = 68 %
  • lyofilizovaný CRM: (53/80) = 66 %
  • Celkem: (97/145) = 67 %

 

 

5.1.2. Stanovení kreatininu

Certifikovaná hodnota referenčního materiálu CRM

  • nativní CRM = 73,9 µmol.l-1 kreatininu
  • lyofilizovaný CRM = 358 µmol.l-1 kreatininu

Kritérium vychýlení: 4,7 %

Rozsah vychýlení při zaokrouhlení na celá čísla:

Anal. systém

A

B

C

D

E

F

Rozsah bias

[%]

0 až +18

-10 až +28

+10 až +15

-5 až +25

-2 až +40

-2 až +10

Rozsah bias

[%]

IMEP–17 (2002) -10 až +15

Počet měření přesahujících kritérium 4,7 %:

  • nativní CRM: (37/69) = 54 %
  • lyofilizovaný CRM: (47/86) = 55 %
  • Celkem: (84/155) = 54 %

 

 

5.1.3. Stanovení sodného kationtu

Certifikovaná hodnota referenčního materiálu CRM

  • nativní CRM = 140,65 mmol.l-1 Na+
  • lyofilizovaný CRM =130,0 mmol.l-1 Na+

Kritérium vychýlení: 0,5 %

Rozsah vychýlení při zaokrouhlení na celá čísla:

Anal. systém

A

B

C

D

E

F

Rozsah bias

[%]

-2 až +1

0 až +2,5

-3 až +0,5

-5 až +1

-4 až +2

-1 až +2

Rozsah bias

[%]

IMEP–17 (2002) -2 až +2

Počet měření přesahujících kritérium 0,5 %:

  • nativní CRM: (22/49) = 45 %
  • lyofilizovaný CRM: (55/81) = 68 %
  • Celkem: (77/130) = 59 %

 

 

5.1.4. Stanovení celkového vápníku

Certifikovaná hodnota referenčního materiálu CRM

  • nativní CRM = 2,235 mmol.l-1 Cacelk
  • lyofilizovaný CRM = 2,360 mmol.l-1 Cacelk

Kritérium vychýlení: 1,4 %

Rozsah vychýlení při zaokrouhlení na celá čísla:

Anal. systém

A

B

C

D

E

F

Rozsah bias

[%]

-3 až +2

-6 až +2

-7 až +8

-4 až +6

-2 až +6

-4 až +4

Rozsah bias

[%]

IMEP–17 (2002) -5 až +5

Počet měření přesahujících kritérium 1,4 %:

  • nativní CRM: (28/59) = 47 %
  • lyofilizovaný CRM: (35/75) = 47 %
  • Celkem: (63/134) = 47 %

 

 

5.1.5. Stanovení celkového hořčíku

Certifikovaná hodnota referenčního materiálu CRM

  • nativní CRM = 0,81 mmol.l-1 Mgcelk
  • lyofilizovaný CRM = 1,17 mmol.l-1 Mgcelk

Kritérium vychýlení: 2,6 %

Rozsah vychýlení při zaokrouhlení na celá čísla:

Anal. systém

A

B

C

D

E

F

Rozsah bias

[%]

+12 až +30

-4 až +4

-5 až +7

0 až +6

-5 až +7

-3 až +8

Rozsah bias

[%]

IMEP–17 (2002) -10 až +10

Počet měření přesahujících kritérium 2,6 %:

  • nativní CRM: (20/50) = 40 %
  • lyofilizovaný CRM: (29/62) = 47 %
  • Celkem: (49/112) = 44 %

 

 

5.1.6. Stanovení celkového železa

Certifikovaná hodnota referenčního materiálu CRM

  • nativní CRM = 20,0 µmol.l-1 Fecelk
  • lyofilizovaný CRM = 36,9 µmol.l-1 Fecelk

Kritérium vychýlení: 12,4 %

Rozsah vychýlení při zaokrouhlení na celá čísla:

Anal. systém

A

B

C

D

E

F

Rozsah bias [%]

-10 až +20

-10 až +20

-5 až -10

-7 až 0

-4 až +2

-10 až +5

Rozsah bias [%]

IMEP–17 (2002) -15 až +5

Počet měření přesahujících kritérium 12,4 %:

  • nativní CRM: (10/58) = 17 %
  • lyofilizovaný CRM: (8/71) = 11 %
  • Celkem: (18/129) = 14 %

 

 

5.1.7. Stanovení celkových proteinů

Certifikovaná hodnota referenčního materiálu CRM:

  • nativní CRM = 68,7 g.l-1 celk. proteinů
  • lyofilizovaný CRM = 52,3 g.l-1 celk. proteinů
  • Kritérium vychýlení: 2,1 %

Rozsah vychýlení při zaokrouhlení na celá čísla:

Anal. systém

A

B

C

D

E

F

Rozsah bias

[%]

-1 až +4

-4 až +3

-1 až +1

-4 až +2

-4 až +4

-8 až +8

Rozsah bias

[%]

IMEP–17: Nebylo měřeno

Počet měření přesahujících kritérium 2,1 %:

  • nativní CRM: (13/49) = 27 %
  • lyofilizovaný CRM: (23/62) = 37 %
  • Celkem: (36/111) = 32 %

 

 

5.1.8. Stanovení glukózy

Certifikovaná hodnota referenčního materiálu CRM

  • nativní CRM = 4,405 mmol.l-1 glukózy
  • lyofilizovaný CRM = 10,80 mmol.l-1 glukózy

Kritérium vychýlení: 3,9 %

Rozsah vychýlení při zaokrouhlení na celá čísla:

Anal. systém

A

B

C

D

E

F

Rozsah bias

[%]

0 až +5

-1 až +8

-5 až +10

-7 až +6

-10 až +10

-5 až +8

Rozsah bias

[%]

IMEP–17 (2002) -10 až +10

Počet měření přesahujících kritérium 3,9 %:

  • nativní CRM: (11/68) = 16 %
  • lyofilizovaný CRM: (19/81) = 23 %
  • Celkem: (30/149) = 20 %

 

 

5.1.9. Stanovení cholesterolu

Certifikovaná hodnota referenčního materiálu CRM

  • nativní CRM = 5,22 mmol.l-1 cholesterolu
  • lyofilizovaný CRM = 4,08 mmol.l-1 cholesterolu

Kritérium vychýlení: 3 %

Rozsah vychýlení při zaokrouhlení na celá čísla:

Anal. systém

A

B

C

D

E

F

Rozsah bias

[%]

-1 až +2

-4 až +7

0 až +5

-6 až +9

-3 až +7

-3 až +5

Rozsah bias

[%]

IMEP–17 (2002) -5 až +5

Počet měření přesahujících kritérium 3 %:

  • nativní CRM: (11/62) = 18 %
  • lyofilizovaný CRM: (24/75) = 32 %
  • Celkem: (35/137) = 26 %

 

 

5.1.10. Stanovení kyseliny močové

Certifikovaná hodnota referenčního materiálu CRM

  • nativní CRM = 303,9 µmol.l-1 kyseliny močové
  • lyofilizovaný CRM = 313 µmol.l-1 kyseliny močové

Kritérium vychýlení: 7,2 %

Rozsah vychýlení při zaokrouhlení na celá čísla:

Anal. systém

A

B

C

D

E

F

Rozsah bias

[%]

-10 až +1

-2 až +2

-7 až +18

-9 až +2

-2 až +5

-7 až +2

Rozsah bias

[%]

IMEP–17 (2002) -3 až +3

Počet měření přesahujících kritérium 3 %:

  • nativní CRM: (4/60) = 7 %
  • lyofilizovaný CRM: (1/73) = 1 %
  • Celkem: (5/133) = 4 %

 

 

5.1.11. Stanovení močoviny

Certifikovaná hodnota referenčního materiálu CRM

  • nativní CRM = 4,91 mmol.l-1 močoviny
  • lyofilizovaný CRM = 16,0 mmol.l-1 močoviny

Kritérium vychýlení: 7,9 %

Rozsah vychýlení při zaokrouhlení na celá čísla:

Anal. systém

A

B

C

D

E

F

Rozsah bias

[%]

-4 až +8

+2 až +11

-5 až +8

-5 až +5

-5 až +8

-5 až +5

Rozsah bias

[%]

IMEP–17 (2002) -10 až +10

Počet měření přesahujících kritérium 7,9 %:

  • nativní CRM: (5/65) = 8 %
  • lyofilizovaný CRM: (6/78) = 8 %
  • Celkem: (11/143) = 8 %

 

 

5.2. Matriční přiměřenost pracovních kalibrátorů a její vyhodnocení [17]

Metoda: stanovení výtěžnosti jako poměru výsledků měření metodou IFCC a rutinní metodou výrobce

Použité kontrolní materiály

  • Směs zamrazených nativních sér
  • Pracovní kalibrátor Roche c.f.a.s

Mírou matriční přiměřenosti pracovního kalibrátoru je míra shody jeho výtěžnosti s výtěžností nativního materiálu

Tabulka uvádí výsledky určení výtěžnosti R [%] pro stanovení katalytické koncentrace ALT a AST:

Analyt

R [%] nativní séra

R [%] kalibrátor c.f.a.s.

AST

103,4

104,8

ALT

100,2

103,5

Z uvedených výsledků byl učiněn závěr, že testovaný kalibrátor je komutabilní pro případ měření katalytické koncentrace AST a „nikoliv perfektně“ komutabilní pro měření katalytické koncentrace ALT.

Dodatečně lze ještě přidat další závěr, že návaznost hodnot kalibrátoru pro tyto analyty - enzymy je zajištěna pouze natolik, že zaručuje vychýlení cca 4-5 % od reference.

 

 

5.3. Matriční přiměřenost v EHK (je vždy zřejmá její nízká úroveň?)

 

Příklad 1: Stanovení CA 19-9

Vychýlení odhadnuté Bland-Altmanovým diagramem

Změřením 80 nativních krevních sér pacientů. Jako „referenční metoda“ zvolen analytický systém Roche Elecsys. Vůči němu pak

Analytický systém

Průměr [%]

Rozsah [%]

Architect Abbott

7,1

87 až 101

Dia Sorin

38

54 až 130

 

Vychýlení odhadnuté z výsledků EHK SEKK

Cykly TM v roce 2004 až 2005 (celkem16 vzorků). Jako „referenční metoda“ zvolen analytický systém Roche Elecsys. Vůči němu pak bias:

Kontrolní vzorek

Architect Abbott

[%]

Dia Sorin

[%]

1

-54,4

42,

2

4,1

43,2

3

15,2

98,4

4

-8,9

135,7

5

9,2

85,4

6

16,4

77,3

7

-2,0

97,0

8

34,7

158,9

9

38,0

92,1

10

3,6

44,8

11

26,8

39,0

12

60,5

9,2

13

26,7

132,6

14

-15,0

0

15

-6,6

33,7

16

5,8

4,3

Bias ± 2 SD

9,6 ± 36,4

69 ± 98,4

Interval EHK

-54,4 až +60,5

0 až +158,9

Dle Bland-Altmana

-101 až +87,1

-130 až +54

 

Závěr

Obrovské rozdíly v hodnotách vychýlení jsou prakticky totožné pro kalibrátory a kontrolní séra. Zde při hodnocení případných rozdílů u výsledků EHK není smysluplné argumentovat nekomutabilitou kontrolních materiálů - disparátnost hodnot vychýlení koresponduje spíše s disparátností hodnot kalibrátorů, než s matričními problémy. Ty, pokud se zde vyskytují, jsou zřejmě dokonale překryty. Problémem, který naprosto dominuje, je velmi nízká úroveň harmonizace analytických postupů, začínající zjevně již od velmi pochybené definice měřené veličiny (neznáme dostatečně strukturu měřeného analytu, nemáme k dispozici škálu exaktních měřicích jednotek).

 

 

Příklad 2: Thyreoidní hormony - nativní vs. „artificiální“ kontrolní vzorky [4]

 Stupeň komutability souvisí s úrovní standardizace měření.

Porovnání prováděno na analytických systémech 10 výrobců, produkujících celkem 24 vlastních „subsystémů“ (Směrnice IVD 98/79 [12] vyžaduje srovnatelnost subsystémů minimálně v rámci jednoho výrobce analytického systému)

 

Rozsah vychýlení (nativní vs. artificiální) uvádí tabulka:

 

Analyt

Nativní vzorky [%]

„Artificiální“ vzorky [%]

TSH

-13,4 až +21,0

-12,6 až +23,7

tT4

-9,4 až +11,4

+8,4 až +5,2

fT4

-21,7 až +15,3

-25,3 až +45,2

tT3

-7,8 až +9,8

-15,7 až +50,8

fT3

-21,2 až +16,4

+19,9 až +96,7

 

5.4. Závěr

Významnou část příčin neadekvátně vysokého vychýlení při stanovení analytů a parametrů můžeme v klinické laboratoři hledat už v hodnotách a matriční přiměřenosti pracovních kalibrátorů výrobců. Aplikace Směrnice 98/79/EC musí věnovat zvýšenou péči harmonizaci mezi kalibrátory různých výrobců a šarží.

 

 

Další informace

Metrologie chemických měření

Literatura II.

 

Bedřich Friedecký, Josef Kratochvíla, Zdeněk Kubíček

recenze Zbyněk Plzák