Hematologické analyzátory-možné interference

EFAEX

Hematologické analyzátory - základní interference impedančně měřených hodnot a stanovení hemoglobinu

 

Erytroidní prekursory - (normoblasty) – při lýze buněk se normoblasty chovají stejně jako leukocyty - zůstanou z nich jádra. Analyzátory s pouze impedančním měřením částic nemohou jádra normoblastů a leukocytů od sebe odlišit a zahrnou vše do počtu leukocytů.

Novější analyzátory, užívající impedanční princip počítání částic, stanovují počet leukocytů i opticky pomocí laseru (při stanovení diferenciálního rozpočtu leukocytů). Laser vzhledem k menší velikosti normoblastů ve srovnání s leukocyty tyto buňky od sebe rozliší a normoblasty nezapočítá do celkového počtu leukocytů. Optický počet leukocytů je potom menší než impedanční, což přístroj komentuje jako podezření na NRBC.

 

Leukocyty x agregáty trombocytů – agregované trombocyty nepodléhají dostatečně lýze a při průchodu měřící leukocytární aperturou zbytky agregátů zvyšují impedanční počet leukocytů. Pokud analyzátor umožňuje optické stanovení počtu leukocytů, může tuto interferenci korigovat - optický počet je menší - a analyzátor tuto skutečnost ohlásí jako podezření na přítomnost jaderných erytrocytů.

 

Trombocyty x schistocyty – drobné úlomky erytrocytů o objemu menším než 35 fl jsou započítány mezi trombocyty. Pokud analyzátor neměří trombocyty ještě jinou metodou (opticky nebo imunologicky), lze na tuto skutečnost usuzovat pouze z tzv. interference na horním velikostním rozhraní v oblasti pro objemy částic kolem 35 fl. Při prohlídce histogramu je vidět atypický tvar křivky a nedostatečně snížený přechod v oblasti kolem 35 fl. Analyzátor hlásí interferenci a je nutné prohlédnout nátěr.

 

Aglutinace erytrocytů – někdy velmi silně deformuje výsledek. Objevuje se při autoimunní hemolytické anemii, paraproteinemii nebo v přítomnosti chladových protilátek autoimunitního typu (většinou neprovázených hemolýzou in vivo). Aglutináty erytrocytů jsou odolné k lýze a zvyšují impedanční počet leukocytů. Optický počet ovlivní také - analyzátor je nedokáže zařadit a ohlásí nediferencovatelné buňky. Protože lýza erytrocytů neproběhne dostatečně, může být snížena i hladina hemoglobinu. Je snížen  počet erytrocytů  protože aperturou prochází několik slepených buněk najednou. Roste MCV, MCH a MCHC na zcela nefyziologické hodnoty. Pomoci může histogram erytrocytů, ve kterém je vidět druhý vrchol v oblasti velkých objemů. Vzorek je nutné buď přeměřit po důkladném promíchání, nebo zahřátí na 37 °C. Pokud se parametry MCH, MCHC neupraví, je nutný nový odběr který je transportován a do analýzy uchováván při teplotě 37°C.

 

Chylosita nebo ikterus velkého stupně mohou ovlivnit hladinu hemoglobinu (spektrofotometrické stanovení) a z ní vypočtené parametry MCH, MCHC. Vzorek lze naředit a snížit tím zákal či zbarvení na únosnou mez. Také vysoké počty leukocytů mohou interferovat s počty erytrocytů a hladinou hemoglobinu (projeví se nefyziologickými hodnotami MCH, MCHC) a je potřeba vzorky ředit. Většinou analyzátor tuto možnost nabízí, není ale vždy automatizována.

 

Nečistoty nebo bakteriální kontaminaci systému odhalíme při změření pozadí. Bakteriální kontaminace vzorku se projevuje nejčastěji při měření trombocytů jako interference na dolním velikostním rozhraní kolem 3 fl. Lze zkontrolovat nátěrem. Obdobně je zdrojem tohoto komentáře přítomnost drobných bublinek v diluentu.

 

Makrotrombocyty x erytrocyty – velké destičky jsou určeny jako erytrocyty a pokud je k dispozici pouze impedanční počet, bývá i interference na horním rozhraní v oblasti 35 fl. Může být tak výrazně snížen počet trombocytů. Je nutná kontrola nátěrem nebo určení počtu trombocytů jinou metodou. Mnohé analyzátory již tyto trombocyty odliší - rozdíly v optickém (nebo imunologickém) počtu a impedančním.

 

 

MCH – střední obsah hemoglobinu v 1 erytrocytu (pg) – mean corpuscular hemoglobin

             výpočet MCH = 10 * Hgb (g/l) / erytrocyty (109/l)

 

MCHC – střední koncentrace hemoglobinu v erytrocytech (g Hgb/l) – mean corpuskular

 hemoglobin concentration

              výpočet  MCHC = Hgb (g/l) / hematokrit * 1000

hematokrit je vypočtenou hodnotou, výpočet Hct = MCV (fl) * erytrocyty (109/l)

 

 

Další informace

Hematologie

 

Eva Fenclová