Hesla a pojmyHESLAHesla - *

Glutathionperoxidáza (GSHPx, GPx)

JRAAA

Glutathionperoxidasa

(EC 1.11.1.9 )

glutathion: peroxid vodíku oxidoreduktasa, GSHPx, GPx

M. h.

 

Je to enzym katalyzující štěpení peroxidu vodíku a současnou oxidaci cystein obsahujícího glutathionu (GSH):

                                              H2O2  +  2 GSH     2 H2O  +  GSSG

Aby tento enzym mohl plynule zajišťovat likvidaci peroxidu vodíku, je třeba regenerovat glutathion v redukované formě. K tomu slouží glutathionreduktáza (GR), která využívá k redukci glutathionu pyridinový koenzym NADPH. 

GSSG  +  NADPH  +  H+    2 GSH  +  NADP+

Výsledkem obou těchto reakcí je rozštěpení peroxidu a současná oxidace NADPH:

H2O2  +  NADPH  tedy +  H+      2   H2O  +  NADP+

Glutathionperoxidáza je společně s katalázou součástí ochranného systému organismu, pomocí něhož se odstraní toxický peroxid vodíku vznikající ze superoxidu působením superoxiddismutázy. Nadbytek peroxidu vodíku by mohl vést ke vzniku hydroxylového radikálu Haber-Weissovou reakcí nebo Fentonovou reakcí. V ochranném systému je funkce glutathionperoxidázy a glutathionreduktázy  spřažena.

 

GSHPx se vyskytuje ve třech různých formách, které se nacházejí v různých oddílech buňky (Middipati et al 1987):

  • c-GSHPx,
  • e-GSHPx,
  • p-GSHPx.

 

Jednotlivé formy se odlišují stavbou molekuly a tedy i imunochemicky a  pohyblivostí v elektrickém poli.  Prvé dvě formy se nacházejí v cytoplazmě buněk (c-GSHPx) a v krevní plazmě, tedy v extracelulární tekutině (e-GSHPx). Jedná se o bílkovinu o molekulové hmotnosti 22 kDa, obsahující v aktivním centru speciální aminokyselinu, selenocystein (selenový analog cysteinu). Je zajímavé, že tato aminokyselina má svou speciální t-RNA; někdy je také nazývána “21. aminokyselinou”. Aktivita GSHPx v plazmě je však řádově nižší než ve tkáních. Nedostatek selenu se projeví poklesem aktivity GSHPx, avšak až tehdy, je-li značný. U pacientů s výraznou deplecí selenu existuje pozitivní korelace mezi hladinou selenu v séru a aktivitou GSHPx v erytrocytech. Třetí typ GSHPx se od předchozích liší. Je vázaná v membráně a odtud i název fosfolipidová glutathionperoxidasa (p-GSHPx). Tento enzym o molekulové hmotnosti 18 kDa redukuje nejen peroxid vodíku, ale na rozdíl od předchozích dvou typů GSHPx i lipidové hydroperoxidy, které přeměňuje na příslušné hydroxylové deriváty lipidů. Tím chrání fosfolipidy buněčných membrán a přerušuje řetězovou reakci poškození jejich lipidů volnými radikály (lipoperoxidaci). Nedojde tak k posledním fázím, kdy by vznikl malondialdehyd, 4-hydroxynonenal a jiné toxicky a mutagenně působící aldehydy (Ursini et al. 1982)

 

Dědičný defekt tvorby GSHPx se projeví stejně jako defekt tvorby GR - činnost obou enzymů je spřažena (Cohen et al. 1985). Výsledkem je poškození buněčných membrán, které nejsou chráněny před lipoperoxidací, což mí za následek mírnou až středně těžkou hemolytickou anémii. Anémii zhoršují látky s oxidačním účinkem včetně některých léků (nitrofurantoin, sulfonamidy).

K méně výraznému poklesu aktivity GSHPx dochází, jak již bylo uvedeno, až u těžké deplece selenu. Zvýšená aktivita GSHPx, vzácně pozorovaná u některých jedinců, nemá klinický význam.

 

Literatura

·         Aebi H.: Catalase. In: Bergmayer H. U. (ed.): Methods of Enzymatic Analysis, vol. 2, Verlag Chemie, Academic Press, Inc., New York, San Francisco, London, 1974, s. 673-684.

·         Babior, B. M.: Superoxide: a two-edged sword. Braz. J. Med. Biol. Res., 20, 1997, s. 141-155.

·         Bannister, J. V., Bannister, W. H., Rotilio, G.: Aspects of the structure, function, and applications of superoxide dismutase. CRC Crit. Rev. Biochem., 22, 1987, č. 2, s. 111-180.

·         Bowler, C., Van Montagu, M., Inzé, D.: Superoxide dismutase and stress tolerance. Ann. Rev. Plant Physiol. Mol. Biol., 43, 1995, s. 83-116.

·         Bray, R. C., Cockle, S. A., Fielden, E. M., Roberts, P. B., Rotilio, G., Calabrese, I.: Reduction and inactivation of superoxide dismutase by hydrogen peroxide. Biochem. J.,  139, 1974, s. 43-48.

·         Cardoso, S. M., Pereira, C., Oliveira, C. R.: The protective effect of vitamin E, idebenone and reduced glutathione on free radical mediated injury in rat brain synaptosomes. Biochem. Biophys. Res. Commun., 246, 1998, č. 3, s. 703-710.

·         Carlioz A., Touati D.: Isolation of superoxide dismutase mutants in Escherichia coli: is superoxide dismutase necessary for anaerobic life? EMBO J., 5, 1986, č. 3, s. 623-630.

·         Fenton, H. J. H.: Oxidation of tartaric acid in the presence of iron. J. Chem. Soc., 65, 1894, s. 899-910.

·         Cohen, H. J., Chovaniec, M. E., Mitretta, D., Baker, S. S.: Selenium repletion and glutathione peroxidase - differential effects on plasma and red blood cell enzyme activity. Am. J. Clin. Nutr., 41, 1985, s. 735-747.

·         Gaetani, G. F., Ferraris, A. M., Rolfo, M., Mangerini, R., Arena, S., Kirkman, H. N.: Predominant role of catalase in the disposal of hydrogen peroxide within human erythrocytes. Blood, 87, 1996, s. 1595-1599.

·         Hasanoglu, E., Altan, N., Sindel, S., Ongun, C. O., Bali, M., Altintass, E.: The relationship between erythrocyte superoxide dismutase activity and plasma levels of some trace elements (Al, Cu, Zn) of dialysis patients. Gen. Pharm., 25, 1994, č. 1, s. 107-110.

·         Henderson, A., Hayes, P.: Acetylcysteine as a cytoprotective antioxidant in patients with severe sepsis: potential new use for an old drug. Ann. Pharmacother., 28, 1994, č. 9, s. 1086-1088.

·         Holeček, V., Racek, J.,Jeschke, J., Zima, T., Krejčová, I.: Einfluss von Vitaminen, Mineralstoffen und spurenelementen auf ausgewählte biochemische und spiroergometri-sche parameter bei Rauchern. Erfarungsheilkunde, 1997, č. 10, s. 590-598.

·         Hosler, B. A., Brown, R. H. Jr.: Copper-zink superoxide dismutase mutations and free radical damage in amyotrophic lateral sclerosis. Adv. Neurol., 68, 1995, s. 41-46.

·         Jain, K. J., McVie, R.: Effect of glycemic control, race (white versus black), and duration of diabetes on reduced glutathione content in erythrocytes of diabetic patients. Metabolism, 43, 1994, č. 3, s. 306-309.

·         Jenner, P.: Altered mitochondrial function, iron metabolism and glutathione levels in Parkinson´s disease. Acta Neurol. Scand., 146, 1993, Suppl., s. 6-13.

·         Leichtweis, S. B., Leewenburgh, C., Parmelee, D. J., Fiebig, R., Ji, L. L.: Rigorous swim training impairs mitochondrial function in post-ischaemic rat heart. Acta Physiol. Scand., 160, 1997, č. 2, s. 139-148.

·         Maddipati, K. R., Gasparski, C., Marnett, L. J.: Characterization of the hydroperoxide-reducing activity of human plasma. Arch. Biochem. Biophys., 254, 1987, s. 9-17.

·         Michiels, C., Raes, M., Toussaint, O., Remack, J.: Importance of Se-glutathione peroxidase, catalase and Cu/Zn-SOD for cell survival against oxidative stress. Free Radic. Biol. Med., 17, 1994 s. 235-248.

·         Porstmann, T., Wietscke, R., Cobet, G., Stamminger, G., Bollmann, R., Rogalski, V.,
Pas, P.: Cu/Zn superoxide dismutase quantification from fetal erythrocytes - an efficient confirmatory test for Down
¢s syndrome after maternal serum screening and sonographic investigations. Prenat. Diag., 11, 1991, s. 295-303.

·         Racek, J., Eiselt, J., Holeček, V., Krejčová, I.:  Extra- and intracellular antioxidative defence in patients under regular dialysis treatment. XVI. International Congress of Clinical Chemistry, London (UK), 7. – 12. 7. 1996.

·         Racek, J., Kučera, M., Holeček, V., Trefil, L., Pašek, Z.: Vliv suplementace vitaminy a stopovými prvky na ukazatele antioxidační ochrany u nemocných s revmatickými chorobami. Klin. Biochem. Metab., 7, 1999, č. 4, s. 239-242.

·         Roth, E., Torok, B., Kelemen, D., Pollak, S.: Free radical mediated injuries after coronary artery occlusion. Basic Res. Cardiol., 84, 1989, č. 4, 388-395.

·         Schneeberger, H., Schleibner, S., Schilling, M., Illner, W. D., Abendroth, D., Hancke, E., Janicke, U., Land, W.: Prevention of acute renal failure after kidney transplantation by treatment with rh-SOD: interim analysis of a double-blind placebo-controlled trial. Transplant. Proc., 22, 1990, č. 5, s. 2224-2225.

·         Speat, N., Aust, S. D.: Effects of glutathione on Fenton reagent-dependent radical production and DNA oxidation. Arch. Biochem. Biophys., 324, 1995, č. 1, s. 111-116.

·         Steinerová, A., Racek, J., Holeček, V.: Účinek podávání  fenofibratu (Lipanthyl 100) a alfa-tokoferolu (vitamin E) na hladinu lipidů a aktivitu superoxiddismutasy. Klin. Biochem. Metab., 3, 1995, č. 2, s. 106-108.

·         Štípek, S.: Antioxidanty a volné radikály ve zdraví a nemoci. Grada-Avicenum, Praha, 2000, ISBN 80-7169-704-4.

·         Thomas, S. R., Neuzil, J., Mohr, D., Stocker, R.: Coantioxidants make alpha-tocopherol an efficient antioxidant for low density lipoprotein. Am. J. Clin. Nutr., 62, 1995, Suppl. 6, s. 1357S-1364S.

·         Thome, J., Foley, P., Gsell, W., Davids, E., Wodarz, N., Wiesbeck, G. A., Böning, J., Riederer, P.: Increased concentrations of manganese superoxide dismutase in serum of alcohol-dependent patients. Alcohol Alcoholism, 32, 1997, č, 1, s. 65-69.

·         Ursini, F., Maiorino, M., Valenta, M., Ferri, L., Gregolin, C.: Purification from pig liver of a protein which protects liposomes and biomembranes from peroxidative degradation and exhibits glutathione peroxidase activity on phosphatidylcholine hydroperoxides. Biochim. Biophys. Acta, 710, 1982, s. 197-211.

·         van Loon, A. P. G. M., Pesold-Hurt, B., Schatz, G.: A yeast mutant lacking mitochondrial manganese-superoxide dismutase is hypersensitive to oxygen. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83, 1986, s. 3820-3824.

·         Weinstein, T., Chagnac, A., Korzets, A., Boaz, M., Ori, Y., Herman, M., Malachi, T., Gafter, U.: Haemolysis in haemodialysis patients: evidence for impaired defence mechanisms against oxidative stress. Nephrol. Dial. Transplant., 15, 2000, č. 6, s. 883-887.

 

Další informace:

·         Klasifikace enzymů

 

Jaroslav Racek