Stanovení
alfa-1-antitrypsinu
Synonyma
α1-antitrypsin, alfa-1 proteinasový
inhibitor, alfa-1-proteinázový inibitor,
serpin peptidasový inhibitor, α1-antiproteáza.
Mezinárodně uznávaná zkratka neexistuje, ale nejvíce se používají A1AT (Google 3 300 000), alpha1AT (Google 2 150 000), méně pak alpha-1-Pi (Google 184 000), A1PI (Google 85 200) a AAT (Google 47 500).
Preanalytická fáze
Maximální
čas od získání do zpracování vzorku je 1 den při doporučené teplotě 4°C. Stabilita α1‑antitrypsinu
v séru nebo plazmě (antikoagulans heparin): 20 – 25 °C 1 den, 4 – 8 °C 1 týden, -20 °C 3 měsíce (Ritchie
doporučuje jen 1 – 2 týdny). Pro dlouhodobé skladování je doporučována teplota
-70 °C.
Použití EDTA, šťavelanu nebo citranu výsledky v plazmě snižuje.
Stanovení ovlivňuje věk (lehce stoupá), pohlaví (vyšší u žen), menopauza
(významné snížení), těhotenství (významné zvýšení). Menstruační cyklus hladinu
neovlivňuje.
Poznámky k analytické metodě
Mezilaboratorní přesnost při nefelometrii v kinetickém režimu na hladině 1,78 g/l CV 5,4% (1983
College of American Pathologists Diagnostic Immunology Survey).
Elektroforetické
metody (raketková elektroimunodifuze, izoelektrická fokuzace na PAGE) se
používají omezeně. Silný deficit α1-antitrypsinu se projeví i
při běžné elektroforéze ve frakci α1‑globulinů. Komerčne jsou také dostupné sendvičové ELISA
a PCR metody.
Mnohem
častější je použití imunoprecipitačních nefelometrických a zejména
turbidimetrických metod, kdy lze stanovit α1-antitrypsin na
běžném automatickém analyzátoru.
Radiální
imunodifuze, dvojrozměrná imunoelektroforéza a měření trypsinové inhibiční
kapacity jsou obsoletní metody.
Referenční metoda neexistuje, certifikovaný referenční materiál: CRM 470 (IRMM Geel, Belgie). EKK toleranční limit je 23 %.
Interference
Koncentraci α1-antitrypsinu snižuje vegetariánská dieta.
Koncentraci
α1-antitrypsinu
zvyšují kontraceptiva.
Další informace
Postupy pro
hodnocení aktivit enzymů
Petr Štern, 2009-10-22