Stanovení amyloidu
A
Synonyma
amyloid AA, sérum amyloid AA protein, SAA protein.
Mezinárodně uznávaná zkratka neexistuje, ale běžně se používá označení SAA protein (Google 492 000).
Preanalytická fáze
Stanovení se provádí v séru
(po odběru odstředit v chlazené centrifuze do 1 h) nebo plazmě
(antikoagulans heparin, EDTA, citran; transport na ledu, odstředit do 30 min
v chlazené centrifuze). Vzorek je nutné skladovat při 2 – 8 °C do 48 h,
při -20 °C možnost delšího skladování. Opakované zamrazení vzorku se
nedoporučuje. Před analýzou je třeba vzorek vytemperovat na laboratorní
teplotu.
Silná hemolýza, lipémie a zákal
ruší při analýze.
Poznámky k analytické
metodě
Obvykle se používá imunoturbidimetrie. Reprodukovatelnost v sérii CV 2,1 – 24,4 %, mezi sériemi 6,5 – 33,2 %.
Technologie ELISA využívá sendvičový postup s peroxidázovou značkou a tetrametylbenzidinovým substrátem. Reprodukovatelnost v sérii CV 2,8 – 6,0 %, mezi sériemi 6,0 – 10,3 %. Výtěžnost 102,2 – 107 %.
Další možností je použití nekompetitivní chemiluminiscence s ALP markerem nebo DELFIA technologie s Eu3+ jako značkou (reprodukovatelnost v sérii CV 4,3 %, mezi sériemi 6,2 % . Rovněž se používá imunoradiometrická analýza.
Amyloid se také snadno vybarvuje u bioptických vzorků Kongo červení
(zelená fluorescence v polarizovaném světle) nebo jódem.
Interference
Výsledky stanovení amyloidu A zvyšuje IL-1, IL-6 a TNF.
Další informace
Postupy pro hodnocení aktivit enzymů
Postupy pro hodnocení koncentrací proteinů
Postupy pro hodnocení koncentrací léků
a drog
Postupy pro hodnocení koncentrací
lipidů
Postupy pro hodnocení vnitřního
prostředí
Petr Štern, 2010-03-06