Stanovení apolipoproteinu
B
Synonyma
Apo
B, ApoB, APOB protein.
Apolipoprotein
B je souhrný název pro obě izoformy B-48 a B-100, není to tedy jejich
synonymum. FLDB (familiar ligand defective Apo B) rovněž není synonymum, protože
se jedná o zmutovaný ApoB při vrozeném deficitu apolipoproteinu B.
Preanalytická fáze
Odebírat po 12 h lačnění. Stanovení se provádí
v séru nebo plazmě (antikoagulans EDTA). Nelze používat heparin jako
antikoagulans, neboť výsledky snižuje. Při odběru vleže jsou výsledky nižší.
Stabilita: 18 - 26 °C 24 h v sérum a 3 dny v plazmě,
2 - 8 °C 3 dny v séru a 10 dnů v plazmě, -20 °C 6 měsíců v séru a 4
týdny v plazmě. Podle Marcoviny lze při analýze imunonefelometrií skladovat
vzorek 6 měsíců při laboratorní teplotě. Při -70 °C stabilní několik let , nicméně Young uvádí pokles o 6,8 % už po 6
týdnech. Nedoporučuje se sérum lyofilizovat.
Itraindividuální variace
jsou 6,0 – 31,2 %. Interindividuální variace 18,1 – 27,2 %. V pozici vsedě jsou
výsledky o 5 – 9 % nižší než vestoje. Zvýšené hodnoty
jsou v těhotenství a u kuřáků.
Apolipoproteiny B jsou
citlivé vůči proteolýze a oxidaci. Stávají se nerozpustnými při ireverzibilní
agregaci a v důsledku delipidace. Proměnlivým způsobem maskují své epitopy
lipidy (zvýšená koncentrace triacylglycerolů falešně zvyšuje výsledky).
Poznámky k analytické metodě
Podle College of American Pathologists Proficiency
Testing Survey jsou doporučenými metodami imunoturbidimetrie a
imunonefelometrie. Imunonefelometrie je považována za nejvhodnější analytickou
metodu.
Pro citlivější metody jako ELISA nebo RIA je měřená
koncentrace Apo B příliš vysoká (velká chyba při ředění).
WHO mezinárodní referenční standard pro
apolipoprotein B nese označení SP3-07. Dosažitelná přesnost měření v sérii CV
< 3 %, mezilaboratorní CV 2,3 – 5,0 %. Tolerační rozmezí EKK je 28 %.
Interference
Výsledky stanovení apolipoproteinu B snižují:
cyproteron, desogestrel, dieta vegetariánská, dieta s velkým obsahem vláken,
estradiol, heparin, hladovění (pokles 20 %), kyselina nikotinová,
levonorgestrel, medroxyprogesteron aj.
Výsledky stanovení apolipoproteinu B zvyšují: albumin, cyklosporin,
dehydratace, dialýza, etanol, estrogen/progesteronová terapie, intralipid,
omega3-mastné kyseliny aj.
Další informace
Postupy pro hodnocení aktivit enzymů
Postupy pro hodnocení koncentrací proteinů
Petr Štern, 2010-03-06