Stanovení barbiturátů
Synonyma
Barbiturany
Jednotlivé složky barbiturátů mají chemické nebo obchodní názvy: Alurate, Amobarbital, Amytal, Aprobarbital, Butabarbital, Butalbital, Butisol, Fenobarbital, Fiorinal, Gemonil, Lotisate, Luminal, Mebaral, Mephobarbital, Metharbital, Nembutal, Pentobarbital, Sekobarbital, Seconal, Talbutal aj.
Preanalytická fáze
Stanovení se provádí v plazmě (koagulant EDTA,
heparin), séru nebo moči případně i žaludeční šťávě nebo tkáňovém extraktu. Pro
sérum nepoužívat separační gely.
Stabilita vzorku: 20 – 25 °C plazma, sérum 1 týden, moč 4
týdny; 4 – 8 °C plazma, sérum 1 – 4 dny, moč 12 týdnů; -20 °C plazma, sérum 2
roky.
Poznámky k analytické metodě
Stanovení využívá kompetitivních
imunoanalytických metod (RIA, EMIT, CEDIA, FPIA, LIA), imunonefelometrie a
imunoturbidimetrie (kompetitivní inhibice vzniku nerozpustných agregátů
fenobarbitalem potaženého latexu s protilátkou), plynové (GC, kapilární GC
i GC/MS) a kapalinové chromatografie (HPLC). Extrakční postupy
s fotometrickou (UV nebo bichromatickou) detekcí mohou být dosti
specifické, ale v současnosti se už nepoužívají.
Jako standard se nejvíce využívá sekobarbital.
Reprodukovatelnost v sérii pro EMIT CV 4,3 –
7,8 %, FPIA 4,2 – 6,0 % (výtěžnost 96 – 100,4 %), imunoturbidimetrii 5,7 – 8,7
%. Toleranční limit EHK: 24 %.
Pro kvalitativní důkaz v moči lze použít proužky
využívající některý z imunochemických principů (obvyklým markerem je
koloidní zlato) nebo postupu TLC.
Interference
Výsledky stanovení barbiturátů snižují: silikonový separátor aj.
Výsledky stanovení barbiturátů v séru zvyšují: acetát, antihistaminika, fenothiaziny, chloramfenikol, kreatinin, kyselina valproová, narkotika aj.
Výsledky stanovení barbiturátů v moči zvyšují: detergenty, fenobarbital, p-hydroxyfenobarbital, rhytmochin, mýdla, spasmoveralgin aj.
Další informace
Postupy pro hodnocení aktivit enzymů
Postupy pro hodnocení koncentrací proteinů
Petr Štern, 2010-03-08