Stanovení
beta-Trace proteinu
Synonyma
(5Z,13E)-(15S)-9α,11α-epidioxy-15-hydroxyprosta-5,13-dienoát Δ-isomerasa,
prostaglandin-D-syntáza, prostaglandin-D-synthasa, prostaglandin-D2-synthasa, PGD2 synthasa, prostaglandin-D-synthetasa, PGD-synthetasa nezávislá na glutathionu, prostaglandin-H2 D-izomeráza, prostaglandin-H2 Δ-isomerasa, prostaglandin-R-prostaglandin-D-isomerasa, prostaglandin endoperoxid Δ-isomerasa, PGH-PGD isomerasa, prostaglandin D lipokalinového typu, Cerebrin 28.
V ČR užívaný firemní název beta-trace protein není oficiální název enzymu EC 5.3.99.2, tím je prostaglandin-D-syntáza. Používá se řada zkratek: PGD2 (Google 125 000), PDS (Google 64 900), PTGDS (Google 3 800), PGDS2 (Google 3 700), ale žádná z nich není mezinárodně akceptovaná.
Preanalytická fáze
Stanovení se provádí v séru, plazmě (EDTA, citran,
heparin), případně v moči nebo mozkomíšním moku. Vzorky je třeba zpracovat
ihned po odběru anebo skladovat (po
odstředění) 2 – 8 °C 7 dnů, déle při -20 °C. Při dlouhodobém skladování je
vhodnější zmrazit na -70 °C. Ke vzorku je vhodné přidat ε-aminokapronovou
kyselinu a azid sodný, aby se eliminovala bakteriální kontaminace. Pětinásobné
zamrazení vzorku nemá vliv na výsledky.
Poznámky k analytické metodě
Běžně se k analýze používá nefelometrických
(protilátka s latexem na polystyrénových částicích, specifita 100 %,
senzitivita 92 %, preciznost 2,3 – 6,5 %) a turbidimetrických metod
s protilátkou vázanou na latexu.
Bylo popsáno také stanovení elektroimunodifuzí (agaróza, veronalový pufr, pH 8,6, Coomassie blue, králičí protilátka proti lidské prostaglandin-D-syntáze).
Dalším postupem je sendvičová ELISA
s protilátkou označenou křenovou peroxidázou. Preciznost v sérii CV
3,73 – 4,42 %, mezi sériemi 3,83 – 4,54 %; výtěžnost 81,5 – 103,3 %.
Certifikovaný referenční materiál: neexistuje. Obvykle se používá rekombinantní
lidská prostaglandin D syntáza lipokalinového typu o hmotnosti 20 300,
obsahující 182 aminokyselinových zbytků.
Interference
Falešně pozitivní výsledky jsou u pacientů s renálním selháním.
Další informace
Postupy pro hodnocení aktivit enzymů
Postupy pro hodnocení koncentrací proteinů
Petr Štern, 2010-03-08