Stanovení digitoxinu
Synonyma
Corramedan, Crystodigin, Cystodigin, Digitalis, Digitoxine, Digitrin, Lanotoxin, Nativelle, Purodigin, Tardigal
Preanalytická fáze
Stanovení se provádí v séru, případně v plazmě (antikoagulanty
heparin nebo EDTA)) 6 – 24 h po podání. Rovnovážný stav je dosažen za měsíc od
zahájení léčby. Existuje riziko adsorpce na separační gely. Zabraňte hemolýze !
Stabilita vzorku (sérum, plazma) 20 – 25 °C: 2 týdny, 4 – 8
°C: 12 týdnů, -20 °C: 24 týdnů.
Poznámky k analytické metodě
Imunochemické postupy jsou nejběžnější.
K dispozici je jen několik komerčních souprav, protože analýza digitoxinu
je požadována jen vzácně.
RIA kompetitivní postup s 125I-digoxinem
dosahuje preciznost mezi dny CV 2,4 %.
Používá se fluorescenční homogenní polarizační
technika (FPIA reprodukovatelnost v sérii CV 3,3 – 8,8 % a mezi dny 2,8 – 8,8
%) a také imunoanalýza s pomocí afinitní chromatografie, která používá
β-galaktosidázu jako značku (ACMIA
reprodukovatelnost v sérii CV 2,7 – 16,0 % a mezi dny 4,4 – 25,9 %).
Při stanovení HPLC v izokratickém režimu na
koloně C18 je digitoxin detekován při 220 nm s precizností CV v sérii
1,4 – 3,3 %. K dispozici jsou také metody na principu plynové
chromatografie a digitoxin se sleduje detektorem elektronového záchytu.
Interference
Výsledky stanovení digitoxinu snižují: cholestyramin, rifampin aj.
Výsledky stanovení digitoxinu zvyšují: ANP, BNP, citronan (FPIA), Digibind, digoxin, EDTA (FPIA), fenobarbital, fenytoin, heparin, chinidin, oxalát (FPIA) aj.
Poznámka
Digitoxin se dnes již prakticky neaplikuje.
Další informace
Postupy pro hodnocení aktivit enzymů
Postupy pro hodnocení koncentrací proteinů
Petr Štern, 2010-03-10