Stanovení
prealbuminu
Synonyma
proalbumin, transthyretin, transtyretin, tryptophan-rich prealbumin, tyroxin vázající prealbumin
Oficiální zkratka neexistuje; nejvíce se používá
TTR (Google 38900) , TBPA (thyroid binding prealbumin) pak podstatně méně. ATTR se používá pouze pro mutagenní transthyretin při
amyloidóze a někdy také nesprávně pro označení protilátky vůči této bílkovině.
Preanalytická fáze
Stanovení se provádí v séru nebo plazmě (antikoagulans heparin nebo
citronan), případně v likvoru (kde je ovšem
koncentrace o řád nižší než v plazmě) nebo také ve stolici. Maximální čas
od získání do zpracování vzorku je 1 h při laboratorní teplotě, 1 den při 4 °C.
Stabilita: 20 – 25 °C 2 – 24 h, 4 – 8 °C 3 – 7 dní, -20° C 3
– 12 měsíců, při -70 °C několik let.
Stanovení ruší hemolýza a lipémie. Heterofilní
protilátky a monoklonální imunoglobuliny (či jejich části) může mohou
interferovat. Biologický poločas 2,5 dne.
Poznámky k analytické metodě
Z imunochemických metod se nejvíce používá nefelometrie nebo
turbidimetrie (elektro-imunodifuze, radiální imunodifuze a radioimunoanalýza
jsou již zastaralé).
Před turbidimetrickou detekcí (340 nm) se provádí precipitace
králičím antisérem s přídavkem polyetylenglykolu v pufru TRIS. Mez
stanovitelnosti je 0,02 g/l; metoda je použitelná až do 5,1 g/l.
Reprodukovatelnost CV v sérii 1,1 – 2,4 %, mezi dny 1,2 – 1,8 %; celkem
3,1 – 3,9 %; výtěžnost 90 – 110 %. Lze použít i kozí protilátku vůči
prealbuminu. V tom případě je rozsah metody 0,009 – 1,34 g/l.
Turbidimetrie se provádí bichromaticky (340 vs. 700 nm) s reprodukovatelností
CV v sérii 2,37 – 4,8 %, mezi dny 5,95 – 9,48 %.
Při nefelometrii v rozsahu 0,05 – 2,4 g/l byla
reprodukovatelnost mezi dny 2,8 – 6,3 %; výtěžnost 92 – 120 %.
Stanovení prealbuminu lze provádět také sendvičovou heterogenní
imunoanalýzou soupravou ELISA v mikrotitračních destičkách.
V prvním kroku se váže stanovovaný prealbumin na protilátku zakotvenou
v jamkách. Po vypláchnutí se přidá druhá protilátka (králičí) značená
peroxidázou. Po opětném vypláchnutí pak substrát (tetrametylbenzidin). Reakce
se zastaví okyselením a barevná reakce se detekuje bichromaticky (450 vs. 620
nm). Mez stanovitelnosti je 0,001 mg/l; ultracitlivá metoda vyžaduje velké
ředění vzorku (40000-krát nebo 80000-krát). Reprodukovatelnost CV v sérii
4,9 %, mezi sériemi 7,5 %; výtěžnost 82 – 115 %.
Při použití
referenčního materiálu CRM 470/RPPHS 5 byla celková nepřesnost 7,92 %. Rozdíly
výsledků mezi laboratořemi činí 12 – 20 %.
Toleranční rozmezí EKK je 23 %, teoretické
toleranční rozpětí 15 %.
Výsledky stanovení prealbuminu snižují: amiodaron, estrogeny, interleukin 6,
malnutrice, and orální kontraceptiva, plazmaferéza,
těhotenství (3. trimestr), vegetariánská dieta, aj.
Výsledky
stanovení prealbuminu zvyšují: anabolické steroidy, androgeny, edecrin,
hemodialýza, lipémie, parenterální výživa, prednisolon, aj.
Další informace
Petr Štern, 2011-01-04