Stanovení propeptidu prokolagenu typu I, N-terminálního (PINP)

Synonyma

peptid prokolagenu I N-terminální

Neoficiální zkratky: PINP, P1NP

Preanalytická fáze

Stanovení se provádí v séru, případně amniové tekutině. Stabilita (sérum): 2 – 8 °C 5 dní, -20° C delší dobu. Lipémie, hemolýza ani ikterus stanovení neruší.

Poznámky k analytické metodě

Imunoradiometrickou sendvičovou metodou lze stanovit PINP v intervalu 5 – 250 µg/l. Polyklonální králičí protilátka se konjuguje s ¹²⁵I. Po dvouhodinové inkubaci se přidá druhá kozí protilátka vůči králičímu PINP, která je vázaná na částice a slouží k separaci imunokomplexu centrifugací. Po dekantaci se měří radioaktivita sraženiny. Detekční limit je 2 µg/l. Reprodukovatelnost v sérii byla CV 8,3 %, mezi sériemi 7,8 %; výtěžnost 97,7 – 114,5 %. Metodou se měří celý propeptid.

Rovněž se vyrábí ELISA souprava stanovení v mikrotitračních destičkách v sendvičovém uspořádání. Detekční limit metody byl pro sérum 0,062 µg/l a pro amniovou tekutinu 0,041 µg/l. Jamky destičky jsou potaženy králičí protilátkou vůči PINP. Přidá se vzorek a druhá protilátka na kterou se přes biotin-streptavidinový můstek naváže křenová peroxidáza. Detekce po zastavení reakce s tetrametylbenzidinem při 450 nm. Reprodukovatelnost v sérii byla CV 2,9 – 4,9 %, mezi sériemi 4,6 – 5,3 %; výtěžnost 93 – 105 %.

Doporučená metoda ani certifikovaný materiál nebyly ještě v roce 2010 k dispozici.

Interference

Koncentrace PINP je zvýšená po hemodialýze.

Další informace

Principy analytických postupů

Petr Štern, 2011-01-04