Stanovení propeptidu prokolagenu typu III, N-terminálního (PIIINP)

Synonyma

peptid prokolagenu III N-terminální

Neoficiální zkratky: PIIINP, P3NP

Preanalytická fáze

Stanovení se provádí v plazmě (antikoagulanty EDTA nebo heparin), séru. Stabilita (sérum): 2 – 8 °C 5 dní, -20° C 1 měsíc, -80 °C 2 měsíce. Lipémie, hemolýza ani ikterus stanovení neruší.

Poznámky k analytické metodě

Imunoradiometrickou sendvičovou metodou lze stanovit PIIINP v intervalu 1 – 50 µg/l. Polyklonální králičí protilátka se konjuguje s ¹²⁵I. Po dvouhodinové inkubaci se přidá druhá kozí protilátka vůči králičímu PINP, která je vázaná na částice a slouží k separaci imunokomplexu centrifugací. Po dekantaci se měří radioaktivita sraženiny. Detekční limit je 0,2 µg/l. Reprodukovatelnost v sérii byla CV 1,7 – 4,3 %, mezi sériemi 3,2 – 5,3 %; výtěžnost 88 – 100 %. Metodou se měří celý propeptid.

Rovněž se vyrábí ELISA souprava stanovení v mikrotitračních destičkách. Souprava stanovuje PIIINP v intervalu 0,0312 – 2 µg/l a mez detekce je 0,012 µg/l. Jamky destičky jsou potaženy králičí protilátkou vůči PIIINP. Přidá se vzorek a druhá protilátka na kterou se přes biotin-streptavidinový můstek naváže křenová peroxidáza. Detekce po zastavení reakce s tetrametylbenzidinem při 450 nm.

Doporučená metoda ani certifikovaný materiál nebyly ještě v roce 2010 k dispozici.

Interference

Při podávání ILGF-I (růstový faktor podobný insulinu) je koncentrace PIIINP zvýšená.

Další informace

Principy analytických postupů

Petr Štern, 2011-01-04