Stanovení LSD
Synonyma
diethylamid kyseliny lysergové, LSD-2, LSD-25, lysergid, Delysid
California sunshine, Lucy in the sky with diamonds, Owsley, Owsley’s
acid, blotter acid, blue heaven, electric Kool-aid, instant Zen, mellow
yellows, purple haze, strawberry fields, yellow sunshine
(6aR,9R)-N,N-diethyl-7-methyl-4,6,6a,7,8,9-
hexahydroindolo-[4,3-fg]chinolin-9-karboxamid
Preanalytická fáze
Stanovení se provádí v moči, případně v krvi. Vzorky je lépe
skladovat v lednici i když uváděná stabilita při 20 – 25 °C je 1 měsíc
stejně jako při 4 – 8 °C. Při zamrazení na -20 °C je stabilita 2 měsíce, ale
nedoporučuje se zamrazovat vzorky určené ke konfirmaci. Vzorky moče je třeba chránit před slunečním světlem, intenzivní
fluorescencí, zvýšenou teplotou a alkalickým pH, aby nedošlo k rozkladu
LSD. LSD lze detekovat 24 – 120 h po podání.
Imunochemické postupy jsou
nejběžnější. Používá se RIA, enzymová imunoanalýza (CEDIA cloned enzyme donor immunoassay, ELISA i EMIT) a KIMS (tj. kinetická interakce mikročástic
v roztoku.
Pro RIA byla reprodukovatelnost v sérii CV 2,5 – 4,9 %, mezi
dny 3,0 – 4,9 %.
Pro CEDIA byla reprodukovatelnost v sérii CV 6,2 – 11,2 %,
mezi dny 8,6 – 12, 6 %.
LSD ELISA postup je kompetitivní imunoanalýza mezi LSD ze vzorku a
LSD značeným křenovou peroxidázou o vazebná místa na polyklonální protilátce,
kterou jsou potaženy jamky mikrotitrační destičky. Po propláchnutí se přidá
tetrametylbenzidin a po zastavení reakce 1 M HCl se sleduje barevná reakce
vertikální fotometrii při 450 nm. Mez detekce je 50 ng/l. Reprodukovatelnost
v sérii je CV 5,9 – 11, 6 %.
Při homogenní metodě KIMS je LSD vázán přes spojovací bílkovinu na
karboxylované polystyrénové částice. Po kompetitivní imunoreakci s kozí
protilátkou se sleduje fluorescence (excitace 320 nm, emise 445 nm) volného
konjugátu. Mez detekce je 200 ng/l. Reprodukovatelnost v sérii CV 1,5 %.
Ačkoliv je u imunoanalýz mez detekce 20 ng/l, je cut-off hodnota
v důsledku křížových interferencí často 250 – 500 ng/l.
Využívá se také řada chromatografických technik (GC, GC/MS, HPLC).
V plynové chromatografii je problémem nevratná adsorpce LSD na
kolonu. K detekci hmotnostní spektrometrii se používá jak elektronová
ionizace, tak ionizace elektrosprejem nebo tandemová metoda. Mez detekce je 50
– 100 ng/l.
Byla popsána také kapilární plynová chromatografie pro analýzy
v terénu.
HPLC s fluorescenční detekcí
(excitace 320 nm, emise 400 nm) používá jako mobilní fázi octan amonný –
metanol 35:65, nebo samotný octan amonný, nebo acetátový pufr
s acetonitrilem a trietylaminem (75:25:0,25). Také ve spojení s HPLC
lze použít MS detekci s elektrosprejem. Při tandemové MS je mez detekce 50
ng/l.
Kapilární
elektroforéza s laserem vyvolanou fluorescencí používá
helium-kadmiový laser generující záření 325 nm. LSD se měří v pufru
citronan-octan. Předtím se musí extrahovat do dichlormetanu a odparek rozpustit
v metanolu. Pro kapilární elektroforézu se používá 300 mm kapilára s litého křemene o průměru 50
µm. Touto metodikou lze stanovit koncentrace 100 – 200 ng/l.
Interference
Výsledky stanovení
LSD v moči zvyšují: amitriptylin, benzfetamin, buproprion, buspiron,
cefradin, desipramin, diltiazem, doxepin, fentanyl, fluoxetin, haloperidol,
chlorpromazin, imipramin, labetolol, metoklopramid, nor-LSD (+25%),
2-oxo-3-hydroxy-LSD (+32%), paroxetin, prochlorperazin, risperidon, sertralin,
thioridazin, trazodon, verapamil, aj.
Další informace
Petr Štern, 2011-02-28