Stanovení lidokainu

Synonyma

Lidocainum

2-(diethylamino)-N-(2,6-dimethylfenyl)acetamid

Anestacon, Baylocaine, Dalcaine, Dilocaine, Duo-Trach, Lanacane, Lidocaine, LidoPen, Lignocaine, Nervocaine, Norocaine, Octocaine, Xylocaine, Xylocard

Preanalytická fáze

Odběr nejméně 12 h, lépe 24 h po aplikaci a pak každých 12 h.

Stanovení se provádí v séru, případně v plazmě (antikoagulans EDTA, oxalát nebo heparin). Transportovat v chladu, odstřeďovat v chlazené centrifuze. Separační gely mohou způsobit ztráty léčiva při adsorpci na gel. Při změně pH séra dochází ke změně vazby na bílkoviny.

Stabilita vzorku 20 – 25 °C (sérum): 6 h, 4 – 8 °C (sérum, plazma): 1 týden, -20 °C (sérum, plazma): 2 týdny. Rozmrazení vzorků se doporučuje pouze jednou.

Poznámky k analytické metodě

Imunochemické postupy jsou nejběžnější a mohou být plně automatizované. Používá se enzymová imunoanalýza (EMIT) a fluorescenční homogenní polarizační technika (FPIA).

EMIT používá jako značku glukóza-6-fosfátdehydrogenázu a kompetitivní uspořádání imunochemické reakce. První činidlo obsahuje protilátku proti lidokainu, glukóza-6-fosfát, NAD⁺, monoetylglycinxylidid a TRIS pufr nastavující reakci na pH 5,0. Druhé činidlo je konjugát lidokainu s glukóza-6-fosfátdehydrogenázou. Reprodukovatelnost v sérii má CV 2,72 %, mezi sériemi 3,43 %; výtěžnost je 90,0 až 101,7 %.

Fluorescein jako marker se používá při homogenní fluorescenční polarizační imunoanalýze (FPIA). Kvůli zajištění disociace léčiv od sérových proteinů a zabránění nespecifických vazeb markeru jsou přítomny povrchově aktivní látky.Reprodukovatelnost v sérii CV 1,9 – 3,0 %, celková 2,1 – 3,7 %.

Plynová chromatografie mepivakain hydrochlorid jako vnitřní standard. Deproteinovaná plazma se po extrakci centrifuguje a supernatant se po alkalizaci extrahuje do sulfidu uhličitého. Gradientová chromatografie 130 až 260 °C umožňuje rozsah měření 40 – 8000 µg/l.

K dispozici je také stanovení HPLC s MS-MS detekcí. Jako vnitřní standard se používá bupivakain. Extrakce vzorku a vnitřního standardu se provádí do terc.butylmetyleteru a zpět do kyseliny fosforečné. Extrakt se nastřikuje na kolonu C₁₈ a jako mobilní fáze se používá acetonitril – octan amonný (7:3, pH 4,5). Linearita metody je v rozsahu 0,2 – 30 µg/l, mez detekce 0,015 µg/l, mez stanovitelnosti 0,2 µg/l, vychýlení -1,3 až +2,3 %, reprodukovatelnost v sérii CV ≤ 2,5 %, mezi sériemi ≤ 3,8 %.

Doporučená metoda ani referenční materiál nejsou dosud k dispozici.

Toleranční rozpětí v EKK není uvedeno.

Interference

Výsledky stanovení lidokainu snižují: barbituráty, bilirubin, fenytoin, hemoglobin (2,5 g/l), α₁-kyselý glykoprotein, aj. Nesmí se použít nádoby obsahující změkčovadlo TBEP tris-(2-butoxyetyl)-fosfát, které způsobuje falešně snížené koncentrace lidokainu.

Výsledky stanovení lidokainu zvyšují: cimetidin, etylmetylglycinxylidid (+30 %), lipémie, noradrenalin, mepivakain (+4,9 %), methemoglobin, propranolol, aj.

Další informace

Principy analytických postupů

Petr Štern, 2011-02-28