Stanovení kyseliny mykofenolové
Synonyma
mykofenolát
Myfortic, Melbex (E)-6-(4-hydroxy-6-methoxy-7-methyl-3-oxo-1H-2-benzofuran-5-yl)-4-methylhex-4-enová kyselina Preanalytická fáze
Stanovení
se provádí v séru, případně v plazmě (koagulant EDTA). Transport doporučený
při 2 – 8 °C.
Stabilita
vzorku (sérum, plazma): 20 – 25 °C: 6 týdnů; 4 – 8 °C: 6 týdnů; -20 °C: 11
měsíců.
Kyselina
mykofenolová se může vázat na
separační gely.
Poznámky k analytické metodě
Kompetitivní EMIT využívá soutěže kyseliny mykofenolové ze vzorku
a konjugátu kyseliny mykofenolové s glukóza-6-fosfátdehydrogenázou a
vazebná místa na protilátce. Enzymová značka je v imunokomplexu
inhibována. Čím více léčiva je ve vzorku, tím méně konjugátu se naváže a měřená
aktivita enzymu bude vyšší. Detekční limit metody je 0,1 mg/l.
Reprodukovatelnost CV v sérii 2,5 – 4,4 %, mezi dny 7, 9 – 10, 8 % a
výtěžnost 95,6 %.
HPLC s UV při 215 nm nebo tandemovou MS
detekcí s elektrosprejovou ionizací. Jako vnitřní standard se používá
karboxybutoxyéter kyseliny mykofenolové. Mobilní fází byl acetonitril a
fosfátové pufry pH 3 a pH 6,5. Detekční limit metody byl 10 – 20 µg/l, pracovní
rozsah metody 0,2 – 25 mg/l, výtěžnost 99 – 103 %, reprodukovatelnost CV
v sérii UV < 5 %, MS 3,1 % a mezi dny UV < 6,2 %, MS 3,6 – 5,3 %.
Kapilární elektroforézou lze stanovit jak kyselinu mykofenolovou, tak její hlavní metabolit
glukuronid kyseliny mykofenolové. Používá se TRIS-pufr a UV detekce při 214 nm.
Mez detekce pro kyselinu mykofenolovou je 0,5 mg/l. Výtěžnost 90,0 – 96,7 %,
reprodukovatelnost CV v sérii 6,9 – 8,2 %, mezi dny 3,4 – 13,2 % (podle
stanovované koncentrace).
Mezinárodně uznávaný standardní materiál ani
referenční metoda nejsou k dispozici.
Interference
Výsledky stanovení kyseliny mykofenolové snižují: hydroxid hlinitý,
hydroxid hořečnatý, cholestyramin, kortikosteroidy, železo, aj.
Výsledky stanovení kyseliny mykofenolové zvyšují: Cellcept, cyklosporin,
aj.
Další informace
Petr Štern, 2011-03-02