Fragmentace
DNA restrikčními endonukleasami - restriktasy II, III, I
Restrikční endonukleáza štěpí molekµlu DNA v místě určité sekvence
nukleotidů. Například bakterie Haemophilus aegypticus produkuje enzym HaeIII,
který štěpí sekvenci
5'GGCC3'
3'CCGG5'
mezi sousedícími nukleotidy G a C. HaeIII štěpí molekulu DNA napříč a
vytváří tak fragmenty s tupými konci. Jiné restrikční enzymy vytvářejí
fragmenty s různou délkou 3’ a 5’konců. Tyto jsou označovány jako lepivé
konce pro svoji schopnost spojovat se s molekulami DNA
s komplementárním lepivým koncem. Je známo více než 400 restrikčních
enzymů, které štěpí více než 100 různých, většinou palindromatických, sekvencí
DNA. Dělí se na třídy I, II a III, které rozeznávají sekvence o délce 4, 5, 6
bází
Další informace
· Klinická genetika: základní
pojmy
· Metody molekulárně genetické
Ivan Šubrt