Stanovení cystatinu C

Stanovení koncentrace cystatinu C se využívá pro detekci změn glomerulární filtrace především v časných stadiích postižení ledvin.

 

Synonyma

cystatin 3;

γ-trace protein, post- γ globulin, neuroendokrinní bazický polypeptid;

CST3, ARMD11

Mezinárodně uznávaná zkratka, uvedená v materiálech IUPAC je CST3 a je také nejčastěji používána (Google 210 000).

 

Preanalytická fáze

Stanovení se provádí v séru nebo plazmě (EDTA nebo heparin), moči a likvoru. Stabilita: 20 – 25 °C 1 den (Jacobs 7 dní při 20 °C), 4 – 8 °C 7 dní, -20° C 3 měsíce, -80 °C 6 měsíců. Vzorky lze 3x rozmrazit a zmrazit. I když hodnota cystatinu C v moči se při uchovávání při 4 °C po dobu 14 dní nemění, doporučuje se zmrazení vzorku.

 

Poznámky k analytické metodě

Stanovení cystatinu C se provádí imunochemicky. Imunodifuze a raketková elektroimunodifuze se považují za zastaralé metody. Použití jiných markerů než částic je možné, ale analýza je pracná a časově náročná.

Nejvíce používané postupy jsou imunonefelometrie a imunoturbidimetrie s využitím latexových částic se zakotvenou protilátkou k zesílení citlivosti reakce. Opakovatelnost u těchto metod je  CV < 3 %, reprodukovatelnost mezi dny < 4 % při koncentraci 1 mg/l. Výtěžnost je 92,4 – 101,3 %, resp. 85 – 115 % podle použité metody. Neruší hemoglobin < 64 g/l, bilirubin < 512 µmol/l a triacylglyceroly < 17 mmol/l, revmatoidní faktor < 1200 kU/l. Citlivost metody je 30 µg/l. 

Komerčně dostupná je také sendvičová ELISA metoda a souprava je použitelná i pro Western blot. Jiná úprava ELISA používá mikrotitrační destičky a protilátka je značená křenovou peroxidázou. Citlivost metody je 0,2 µg/l ? – R&D graf začíná u 200 µg/l. Opakovatelnost má CV < 5 – 10 %, reprodukovatelnost mezi dny 5 – 6 % a výtěžnost 87 – 99 %.

Korelace mezi imunoturbidimetrií a ELISA je poměrně dobrá (r = 0,964), mezi imunonefelometrií a ELISA je rovněž vyhovující (r = 0,959).

Tolerační rozmezí EKK je 20 %.

 

Nejvíce používané principy na domácím trhu jsou PENIA (nefelometrie) a PETIA (turbidimetrie). Rozdílná je kalibrace metod, takže jsou různé referenční intervaly a pro odhad GFR je nutné použít správný způsob výpočtu.

 

Interference

Do roku 2010 nebyly žádné interference v literatuře uvedeny. Nicméně u zákalových metod může rušit vlastní zákal séra a u všech metod interferují velmi vysoké hodnoty triacylglyceridů.

 

Praktické poznámky

• Stanovení cystatinu C je dobrou alternativou stanovení kreatininu zejména v situacích jemných změn nebo málo snížených hodnot glomerulární filtrace (GFR).
• Odhad hodnoty GFR je nutné provádět s ohledem na princip stanovení.
• Cystatin C vykazuje při stanovení podstatně méně interferencí než kreatinin.
• Stanovení cystatinu C je finančně náročné, ale v určitých situacích (hyperbilirubinémie, hraniční hodnoty renálních funkcí, dětský věk, sledování rejekce ledviny a podobně) je zcela nezbytné.
• Tzv. „creatinine-blind“ zóna glomerulární filtrace je jednou z indikací pro stanovení cystatinu C, podobně je tomu při očekávaných interferencích při stanovení kreatininu, při dietě s obsahem proteinů, při svalovém katabolismu a podobně.

 

 

Referenční intervaly cystatinu C v plazmě (séru) pro kalibraci PENIA (Dade-Behring/Siemens) a PETIA (Dako).

 

Metoda	Skupina	Věk	Cystatin C (mg/l)
PENIA	Děti	pod 3 měsíce	0,81 - 2,32
	Děti	1 - 3 roky	0,50 - 1,25
	Děti	4 - 19 let	0,58 - 0,92
	Muži	20 - 59 let	0,54 - 0,94
	Ženy	20 - 59 let	0,48 - 0,82
	Muži, ženy	nad 59 let	0,63 - 1,03
PETIA	Děti	3 - 30 dnů	2,4 (97,5. percentil)
	Děti	4 - 11 měsíců	1,52 (97,5.percentil)
	Děti	1 - 16 let	0,63 - 1,33
	Dospělí	20 - 50 let	0,70 - 1,21
	Dospělí	nad 50 let	0,84 - 1,55
	Dospělí	bez ohledu na věk	0,60 - 1,21

 

 

 

Další informace

Cystatin C

Cystatin C v likvoru

Cystatin C v plazmě

Postupy pro hodnocení vnitřního prostředí

 

Petr Štern, Antonín Jabor  (2010-03-10)