Mez detekce (Limit of detection - LD), někdy také nazývaná „mez dokazatelnosti“ je definována jako nejmenší množství složky, analytu, které může být ve vzorku kvalitativně dokázáno (odlišitelné od signálu šumu či blanku), nikoliv však stanoveno jako explicitní číselná hodnota.

Je-li stanovení číselné hodnoty přesto provedeno, bývá to s nevhodně vysokou nejistotou. Mez detekce je tedy množství (či koncentrace) složky či analytu, které vygeneruje odezvu rovnou součtu průměrné hodnoty blanku plus trojnásobku jeho směrodatné odchylky (s_bl).

Pokud předpokládáme že odezva blanku je rovna nule, pak:

LD = 3 s_bl

Mez detekce se většinou experimentálně stanovuje změřením odezvy blanku (respektive kalibrátoru o nulové koncentraci analytu), přičtením trojnásobku hodnoty jeho směrodatné odchylky a konverzí této hodnoty na hodnotu obsahu, množství (koncentraci). Koeficient 3 je výsledkem zaokrouhlení součinu 2*1,65, vycházejícího z úvah o normální distribuci měření koncentrace slepého pokusu.

Hodnota meze detekce vyjadřuje schopnost analytického systému rozlišit přístrojový šum od indikované odezvy – analytického signálu.

Hodnota meze detekce patří mezi nejdůležitější znaky analytické metody a parametry validace kvalitativních a semikvantitativních metod.

Poznámka

Protože se nyní již pojem „semikvantitativní“ oficiálně nepoužívá, je lépe mluvit o kvantitativních metodách s vysokou kombinovanou nejistotou (patří sem často metody POCT, reflexní fotometrie pro odečet testovacích proužků aj.), hodnocených na nominální a/nebo ordinální stupnici.

Negativní výsledek zkoušky znamená buď nepřítomnost analytu ve vzorku nebo jeho přítomnost v množství nižším, než je daná mez detekce.

Příklady meze detekce při základní analýze moči pomocí testovacích proužků
Analyt	Mez detekce	Poznámka
Glukóza	2 až 7 mmol/l	Podle výrobce proužků
Celková bílkovina	0,15 až 0,3 g/l	Podle složení bílkoviny
Erytrocyty	5 až 10 (10⁶/l)	Podle výrobce proužků
Leukocyty	10 až 20 (10⁶/l)	Podle výrobce proužků

Podrobný přehled navržených mezí pro násobné testovací proužky uvádí další tabulka (Evropská direktiva pro analýzu moči). Všimněte si i v ní uvedené konfirmační meze - LC.

Navržené meze detekce a konfirmace pro násobné testovací proužky
Analyt [jednotka]	Srovnávací metoda	Mez detekce (LD)	Mez konfirmace (LC)
Leukocyty [10⁶/l]	Odečet v komůrce a)	20	100
Erytrocyty [10⁶/l]	Odečet v komůrce a)	10	50
Albuminy (proteiny) [g/l]	Imunochemicky (nebo vazba barviv u celkových proteinů)	0,1 (alb) 0,2 (prot)	0,5 (alb) 1 (prot)
Nitrity [mg/l]	Vážením na vysušený dusitan sodný nebo jiná srovnávací metoda	0,5	2,5
Glukóza [mmol/l]	Kvantitativní metoda (glukózadehydrogenázová nebo hexokinázová metoda)	3	15
Ketony [mmol/l]	Vážením na acetoctan lithný	1	5
Specifická hmotnost	Refraktometrie	±0,005 b)	N/A b)
pH	pHmetr (potenciometrie)	±1 jednotka b)	N/A b)
Kreatinin [mmol/l]	Enzymaticky (nedoporučena Jaffého metoda)	±4 d)	N/A b)
Bilirubin [µmol/l]	Roztok bilirubinu	10	50
Urobilinogen (µmol/l )	Není běžně dostupná	20 c)	100 c)
Poznámky: a) Mikroskopický odečet v komůrce, čerstvý (méně než 2 hod.), necentrifugovaný vzorek moči. b) N/A = mez detekce a stanovitelnosti nelze použít, je proto použit rozsah v rámci arbitrární třídy. c) Nejsou k dispozici srovnávací metody. Výrobce testovacího proužku vždy musí uvést způsob nastavení a validace proužku ve své firemní dokumentaci (norma IVD). d) Výrobce uvádí arbitrární škály v rozmezí 0,9; 4,4; 8,8; 17,7 a 26,5 mmol /l.

Při detekci léčiv, drog a xenobiotik v toxikologii bývají meze detekce ztotožněny s hodnotami rozhodovacích limitů mezi aplikací léčiva či drogy a jejím nepoužitím. Hodnota LD pak bývá validována použitím referenčních materiálů, které mají tento obsah - koncentraci analytu.

Metody molekulární biologie posunuly hodnoty meze detekce o několik řádů níže. Například metoda dvojité (nested) PCR dovolí průkaz přibližně 100 - 1000 genů, virů, bakterií v jednom mililitru. Aplikace metod molekulární biologie a miniaturizovaných technik - mikročipů a mikroarray posouvá hodnoty LD do dimenzí určujících počty detekovaných molekul v analyzovaných vzorcích, tedy do oblasti jednotek fmol a ymol (SI jednotky a látkové množství).

Další informace

Mez stanovitelnosti

Chemometrie

Statistické postupy v laboratorní medicíně

Bedřich Friedecký, Josef Kratochvíla, recenzoval Zdenek Kubíček