Hmotová spektrometrie je kvalitativní i kvantitativní analytická metoda obecně využívaná ke stanovení molekulové hmotnosti a k určení sekvencí aminokyselin v peptidech a proteinech.
a)
Hmotová spektrometrie - MALDI (matrix-assisted laser desorption/ionization)
umožňuje měření hmotnosti proteinů ve směsi nebo získávání peptidových map
- ionty jsou akcelerovány elektrickým polem a unášeny k detektoru
-
hmota iontu je počítána z času
potřebného k přesunutí iontu do detektoru
b) Hmotová spektrometrie - ionizace elektrosprejem (ESI) umožňuje stanovení pikomolárních množství proteinů o molekulové hmotnosti nad 100 kD
- vzorek je zmlžován na jemné částice při průtoku kapilárou umístěnou v elektrickém poli (3 - 6 kV)
- v praxi napojen na kapilární kolonu GC nebo HPLC systému
- na rozdíl od MALDI elektrosprej poskytuje podobně citlivé výsledky při aplikaci velkých proteinů
Technika sériového spojení
hmotnostních detektorů je aplikovatelná na rychlé sekvenování peptidů
obsažených v komplexu biologických směsí
- spojeny dva nebo více hmotových spektrometrů
- v prvním je hledaná sloučenina selektivně ionizována a její charakteristické ionty jsou dále odděleny
vybrané primární ionty, které nemohou vytvořit fragmenty, jsou separovány a identifikovány v dalším MS
Další informace
.