Metody stanovení plazmatické (sérové) koncentrace
srdečních troponinů (cTn) jsou u všech komerčně dostupných souprav ke
kvantitativnímu stanovení založeny na principu heterogenních imunoesejí.
V iniciální fázi stanovení dochází k navázání analytu specifickou
protilátkou fixovanou na vhodný povrch (mikročástic, reagenční kyvety aj.).
V následné fázi dochází k navázání druhé specifické protilátky, která
je značená. Koncentrace indikátoru se po separaci volné a vázané fáze měří
(chemiluminiscencí, fluorescencí, elektrochemiluminiscencí apod.).
Použité protilátky musí být principiálně zaměřeny na
dva různé epitopy v molekule cTn, které jsou
·
blízko
sebe a lokalizovány v centrální, vůči proteolýze relativně rezistentní části
polypeptidového řetězce cTn a
·
dostupné
a zůstávají zachovány ve všech formách cTn, které se po uvolnění
z kardiomyocytu objevují v krvi, aby souprava vůči nim reagovala
ekvimolárně.
Kalibrátorem, který by v
maximální míře respektoval formy cTn, přítomné v krvi po uvolnění cTn
z kardiomyocytu, by optimálně byla zřejmě vhodná kombinace komplexu cTnI-C
s volným cTnT, resp. rekombinantní komplex cTnT-I-C (Collinson a spol.
2000).
Analytický
systém
Soupravy jsou bezvýjimečně součástí analytických systémů,
tj. jsou použitelné pouze v kombinaci s konkrétním analyzátorem.
Soupravy a přístroje jednotlivých výrobců jsou nezaměnitelné.
Troponin T
Díky mimořádně účinné patentové ochraně existuje
celosvětově monopolní producent soupravy a systému ke stanovení cTnT, tj. ROCHE
Diagnostics. Souprava používá ke stanovení myší monoklonální protilátku (M7)
zaměřenou na epitop cTnT tvořený aminokyselinovými reziduí v poloze 125-
Troponin I
V současné době je známo celkem deset producentů
souprav resp. systémů ke stanovení cTnI, z nichž šest bylo nebo je
zastoupeno na českém trhu. Mezi nejvíce používané systémy u nás patří Abbott
(AxSym), Bayer (ACS 180, Centaur), Beckman Coulter (Access), Dade Behring
(Stratus, Dimension), DPC (Immulite, Immulite Turbo) a Ortho-Clinical
Diagnostics (Vitros Eci). Porovnání
diagnostických souprav pro stanovení cTnI je uvedeno
samostatně. Podle přehledu CAP v USA bylo v roce 2001 prováděno
podstatně více měření cTnI než cTnT (94 : 6 procent), v Evropě může být
situace odlišná.
Volba
vyšetřovaného materiálu
Sérum je nepochybně nejvhodnějším materiálem ke stanovení
cTnT i cTnI (Gerhard a spol., 1999). U některých nemocných je použití séra
k analýze spojeno s rizikem přítomnosti fibrinových mikrosraženin
nebo lipoproteinových agregátů. Všechna antikoagulancia (hepariny, oxalát,
citrát, EDTA) mohou vyvolávat nesystematická falešná snížení výsledků
stanovení, která mohou být u jednotlivých nemocných a podle použité soupravy
rozdílná. V podrobnostech je třeba odkázat k údajům jednotlivých
producentů.
Další informace
Troponiny: porovnání cTnT a cTnI
Troponiny: porovnání výrobců cTnI
Biochemické markery poškození myokardu
Miroslav Engliš
.