Kompetitivní metody ligandové analýzy spočívají v tom, že vazebné činidlo (reagens) je v reakci přítomno v limitovaném množství a o jeho vazebná místa soutěží (kompetují) vhodně značený ligand (L*) se stejným, avšak neoznačeným, ligandem (L), který je přítomen v analyzovaném vzorku. Dochází k saturaci vazebných míst oběma ligandy. Průběh popisuje vztah:
L + L*
+ VR « L‑VR
+ L*‑VR
Indikátorem pro kvantifikaci průběhu analýzy je značený ligand. Množství komplexu vazebné reagens ‑ značený ligand (L*-VR) je v daném případě nepřímo úměrné množství stanoveného ligandu.
Vedle kompetitivních imunoanalytických metod, využívajících reakci mezi specifickou protilátkou a antigenem, existují i principiální analogy těchto metod, založené na neimunologickém charakteru vazby. Mezi ně patří například:
· metoda kompetitivní vazby s proteiny (CPBA), která používá jako vazebného reagens transportní proteiny séra, např. globulin vázající tyroxin (TBG),
· enzymová analýza (EA) používající jako vazebné reagens enzym,
· receptorová analýza (RA) používá jako vazebné reagens receptory, t.j. buněčné vazebné bílkoviny.
Metody se liší i z hlediska své specifičnosti. Metody CPBA nejsou příliš specifické, na transportní protein se mohou vázat i látky s podobnou strukturou (např.T4 i T3 ). Enzymy vykazují vyšší afinitu pro nízkomolekulární látky, avšak specifita není absolutní. V případě receptorů specifita navíc odráží i biologickou aktivitu stanovované látky.
Další informace a hesla:
· Ligandová analýza – využití interakce Ag-Ab
· Ligandová analýza - kompetitivní metody
· Ligandová analýza - nekompetitivní metody
· Ligand
· Ligandová analýza - protilátky
· Ligandová analýza - příprava Ab
· Specifičnost imunochemické reakce
Další údaje
·
Měření
Vladimír
Bartoš
.