Protilátky jsou imunoglobuliny krevního séra. V krevním séru jsou nejvíce zastoupeny imunoglobuliny třídy IgG a IgM, Tyto imunoglobuliny je možné oddělit od ostatních složek séra a získat tak směs imunoglobulinů. Pokud se oddělení imunoglobulinů neprovede, hovoříme o antiséru.
Lehké řetězce (L) mají variabilní (VL) a konstantní (CL) část. Rovněž těžké řetězce (H) mají část variabilní (VH) a konstantní (CH). Variabilní části jsou tvořeny vždy 100 až 110 aminokyselinovými zbytky na N-konci řetězců. Ve variabilních částech jsou soustředěny aminokyseliny, jejichž záměny určují specifitu protilátky. Tato část se nazývá vazebné místo (vazebná kapsa) protilátky - paratop.
Lehké řetězce jsou společné pro všechny třídy imunoglobulinů a jsou rozděleny na základě konstantních částí do dvou typů: typ k (řetězec kappa) a typ l (řetězec lambda). Těžké řetězce mají několik variant konstantních částí a podle nich jsou imunoglobuliny rozděleny do jednotlivých tříd: g pro IgG, µ pro IgM, α pro IgA, d pro IgD a e pro IgE.
Interakce mezi antigenem a protilátkou se odehrává na ploše 7 - 9 nm2, což představuje 15 - 22 aminokyselin molekuly imunoglobulinu. Vzhledem k tomu, že protilátka je prostorovým útvarem, může se jednat o příspěvek různých oblastí molekuly. Kontakt haptenů s protilátkami je vzhledem k malým rozměrům haptenů na menší ploše.
Jestliže se dva odštěpené variabilní úseky řetězce protilátky (VL a VH) spojí peptidem, vznikne tzv. fúzní protein. Tyto proteiny mají šestkrát nižší molekulovou hmotnost než protilátka a je možno je množit v kulturách Escherichia coli. Fúzní proteiny mají stejné vlastnosti jako protilátky, avšak vzhledem k velikosti molekuly s antigenem reagují rychleji a jsou také používány jako náhrada protilátek v imunochemických testech s rychlou odezvou.
Obrázek demonstruje čtyřřetězcovou na příkladu IgG strukturu a domény (VH, CH a další viz Imunoglobuliny-struktura ). Místa štěpení molekuly působením pepsinu a papainu jsou vyznačena vlnovkami, disulfidické můstky interřetězcové i intrařetězcové jsou vyznačeny symbolem -S-S-.
Další informace a hesla:
·
Ligandová
analýza - protilátky
·
Vazebné
místo (binding site)
·
Ligandová
analýza - příprava Ab
·
Ligandová
analýza - imunoanalýza
·
Ligandová
analýza - interakce Ag-Ab
·
Ligandová
analýza - kompetitivní metody
·
Ligandová
analýza - nekompetitivní metody
Vladimír
Bartoš, Jaroslava Vávrová
.