Odborné textyRepetitorium - klinická genetikaRepetitorium - biochemie obecná

MS LC-MS

JVAXM

Kapalinová chromatografie / hmotnostní spektrometrie (LC-MS)

 

  • technicky mnohem náročnější ve srovnání s GC-MS, místo 1 ml/min nosného plynu (pro GC-MS) se musí před vstupem do hmotnostního analyzátoru odstranit 1 ml/min kapaliny, tj. 22,4x více (pro HPLC-MS)
  • mobilní fáze se obvykle přímo účastní ionizačního procesu, např. APCI či ESI (kromě EI)
  • spektra není možné porovnávat s knihovnou, protože knihovny pro LC-MS spektra neexistují, mohou se výrazně lišit podle použité ionizační techniky, pracovních podmínek i typu přístroje (platí kromě EI)
  • spektra je nutné interpretovat manuálně (velmi záleží na zkušenostech operátora, na porovnání s analogickými typy látek či literaturou)

  

Systémy s obrácenými fázemi (RP-LC)

  • nejběžnější, obvykle vodný roztok metanolu nebo acetonitrilu (ideální pro API-MS), lze i etanol, 2-propanol, atd.
  • nejlepší odezva obvykle při vysoké koncentraci organického rozpouštědla cca 70 – 90%
  • při vysokém až 100% obsahu vody zvýšit průtok a teplotu sušícího a zmlžujícího plynu (nižší citlivost)
  • 100% acetonitril při APCI vyžaduje častější čištění výbojové elektrody (tvorba grafitického uhlíku na elektrodě)

 

Systémy s normálními fázemi (NP-LC)

  • většinou špatně kompatibilní s ESI, lepší kompatibilita s APCI
  • v mobilní fázi musí být určitý obsah (>5%) proton-donorního rozpouštědla, např. 2-propanol;
  • ve 100% hexanu nelze signál získat
  • snaha vyhnout se halogenovaným rozpouštědlům (CH2Cl2, CH3Cl, CCl4) kvůli zhoršení stability signálu
  • u NP-LC může být užitečný přídavek vhodného eluentu (např. 2propanol, popř. s kyselinou octovou či mravenčí) za kolonou

 

LC-MS: ionizace

  

LC-MS-ESI

Nanoelektrosprej

LC-MS-API

API: Vliv složení mobilní fáze a konstrukce iontového zdroje na odezvu

MS LC-MALDI

 

MS Particle Beam

MS LC-DLI

 

LC-MS typy geometrií iontového zdroje

 

 

Další informace

 

 

Literatura

 

Jaroslava Vávrová