Fluorescenční hybridizace in situ (FISH) je variantou hybridizace in situ, kdy detekce sondy DNA je provedena s využitím imunofluorescence. U přímo značených sond je jejich detekce možná ve fluorescenčním mikroskopu použitím excitačního filtru odpovídající vlnové délky. Pro obarvení chromosomů na preparátu (angl. counterstaining) se nejčastěji používá propidium jodid (červené chromosomy ve fluorescenčním mikroskopu) nebo 4,6-diamidino 2-phenylindol (tzv. DAPI), kterým se chromosomy barví modře s naznačenými světle a tmavě modrými pruhy.

Metoda FISH je úspěšně využívána při:

· Studiu karyotypu buněk v metafázi nebo interfázi

· Určování početních a strukturních chromosomových odchylek

· Detekci minimální reziduální choroby nebo časného relapsu u leukemií

· Detekci typu buněk, které jsou zahrnuty v neoplastickém procesu

· Určení, zda se jedná o maligní proces, klonální evoluci nebo benigní proliferaci

· Určení chromosomového vybavení jader v interfázi

Kromě širokého uplatnění klasické fluorescenční hybridizace in situ v cytogenetických laboratořích se neustále vyvíjí řada modifikací tohoto postupu jako jsou:

· Hybridizace in situ s vysokým rozlišením (fiber FISH)

· Mnohobarevné pruhování s vysokou rozlišovací schopností (mBAND)

· Mnohobarevné karyotypování lidských chromosomlů (mFISH)

· Hybridizace: mikro-FISH

· Hybridizace: PRINS (PRimed IN Situ labeling)

Další informace

· Cytogenetika: klasické metody

· Molekulární cytogenetika

· Hybridizace in situ

· Hybridizace komparativní genomová (CGH)

· Hybridizace komparativní genomová: matrix CGH

· Klinická genetika

· Metody molekulárně genetické

· Klinická genetika: základní pojmy

Kyra Michalová

Hybridizace in situ fluorescenční (FISH)